Клеточные биотехнологии, трансплантология

Способ получения культуры ксеногенных тироцитов для лечения гипотиреоза у человека, заключающийся в том, что выделяют щитовидную железу у новорожденного кролика, промывают ее в холодной питательной среде 199 с антибиотиками, механически измельчают, инкубируют в растворе, содержащем 1 % коллагеназы и 0,125 % трипсина, при периодическом встряхивании в течение 15 минут при температуре 27 °С, затем в течение 15 минут постепенно повышают температуру до 37 °С, отделяют фракцию тироцитов центрифугированием, дважды отмывают указанной средой, разводят до конечной концентрации 150-350 тыс. клеток или их кластеров в 1 мл питательной средой, содержащей DMEM/F12 и IMDM в соотношении 1:1 и 20 % нативной сыворотки крови эмбрионов крупного рогатого скота, культивируют на питательной среде со стабилизированной человеческим альбумином тонкопластинчатой коллагеновой подложкой при 37 °С в СО2-инкубаторе, причем один раз в сутки проводят смену питательной среды, в которую, начиная со вторых суток, вносят тиротропин в количестве 70 мЕд/мл, а начиная с седьмых суток - соматостатин в количестве 5 Ед/мл, затем, начиная с двенадцатых суток, постепенно в течение трех суток снижают температуру культивирования до 24 °С, затем в течение трех суток поднимают ее до 37 °С, после чего культуру тироцитов отделяют от среды культивирования, отмывают и помещают в микропористый полиамидный биоконтейнер.

Способ лечения сахарного диабета путем трансплантации ксеногенной культуры эмбриональных островковых клеток в красный костный мозг реципиента, отличающийся тем, что через год дополнительно осуществляют трансплантацию в мышечную ткань.

Способ трансплантации культуры ксеногенных островковых клеток поджелудочной железы в сосудистое русло, отличающийся тем, что культуру клеток помещают в иммуноизолирующую капсулу и фиксируют ее на стенке предварительно сформированного из кубитальных артерии и вены соустья.

Способ хирургического лечения инсулинзависимого сахарного диабета путем трансплантации ксеногенных в-клеток поджелудочной железы, заключенных в микропористую полупроницаемую капсулу, в артериальный кровеносный сосуд, отличающийся тем, что при трансплантации микропористую капсулу с культурой в-клеток вводят в глубокую артерию бедра с использованием аутовенозной пластики.

Способ подготовки трансплантата островковых клеток поджелудочной железы к посадке в сосудистое русло, включающий их введение в биосовместимый контейнер для трансплантации, отличающийся тем, что клетки в контейнер вводят с помощью стерильного шприца, а в качестве контейнера используют герметичную макрокапсулу объемом 2 мл из полиамидной мембраны с порами радиусом 1,2 мкм, которую перед трансплантацией в сосудистое русло реципиента предварительно помещают не более чем на 20 минут в свежую культуральную среду.

Способ закрытия тканевых дефектов путем применения трансплантатов, включающих культуру аллогенных фибробластов, отличающийся тем, что на раневую поверхность дефекта накладывают трансплантат, представляющий собой амниотическую оболочку с культивированными на ней фибробластами, причем культуральным слоем к раневой поверхности, а приготовление трансплантата осуществляют путем выращивания in vitro культуры фибробластов в течение 28-35 дней, последующего нанесения культуры на амниотическую оболочку и совместного их культивирования в течение 7 дней.

Способ лечения инсулинзависимого сахарного диабета, включающий пересадку трансплантата островковых клеток поджелудочной железы, отличающийся тем, что пересадку трансплантата проводят в сосудистое русло, при этом используют островковые клетки, которые при культивировании подвергают температурной адаптации путем постепенного в течение 5 суток снижения температуры до 24 °С, а затем постепенного в течение 5 суток ее подъема до 37 °С в условиях обогащения атмосферы азотом на 10 об. %.